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| 產(chǎn)地 | 美國(guó) |
| 品牌 | zymo |
| 貨號(hào) | |
| 用途 | 亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換 |
| 包裝規(guī)格 | 50 Rxns |
| CAS編號(hào) | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品亮點(diǎn)：
最快的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換試劑盒完全亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換DNA甲基化分析。
隨時(shí)可用的轉(zhuǎn)換試劑直接添加到DNA。
高產(chǎn)，轉(zhuǎn)化DNA是理想的PCR，甲基化特異性PCR (MSP)，陣列，文庫(kù)準(zhǔn)備，下一代測(cè)序等。
產(chǎn)品描述：
EZ DNA Methylation-Lightning Kit可以在不到1.5小時(shí)內(nèi)快速亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化和純化DNA。一種隨時(shí)可用的轉(zhuǎn)換試劑簡(jiǎn)化了這個(gè)過(guò)程-簡(jiǎn)單地添加試劑直接到樣品和孵卵。在自旋柱上對(duì)轉(zhuǎn)換后的DNA進(jìn)行脫硫和清理，允許低至10 ul的洗脫量。該試劑盒實(shí)現(xiàn)了未經(jīng)修飾的胞嘧啶到尿嘧啶的高轉(zhuǎn)換效率，確保準(zhǔn)確的下游甲基化分析。
適用于 | 提純、轉(zhuǎn)化的DNA質(zhì)量高，適合于下游過(guò)程，包括下一代測(cè)序文庫(kù)準(zhǔn)備、PCR擴(kuò)增等。 |
轉(zhuǎn)化率 | > 99.5% |
洗脫體積 | ≥ 10 μl |
設(shè)備 | 帶有加熱蓋和微型離心機(jī)的溫度計(jì)。 |
輸入 | 100 pg - 2 μg of DNA. |
處理時(shí)間 | 1.5 hours |
復(fù)蘇 | > 80% |
樣本來(lái)源 | 純化基因組DNA、酶切DNA、線性化質(zhì)粒DNA等。DNA應(yīng)該是高質(zhì)量和無(wú)rna的 |
Q1:亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化DNA的擴(kuò)增推薦用哪種聚合酶?ZymoTag DNA聚合酶是專門設(shè)計(jì)用于亞硫酸氫鹽擴(kuò)增反應(yīng)。ZymoTaq可作為獨(dú)立的聚合酶(E2001/E2002)，預(yù)混料(E2003/E2004)，和qPCR預(yù)混料(E2054/E2055)Q2:脫硫緩沖液的孵育時(shí)間是否建議超過(guò)20分鐘?將脫硫緩沖液留在色譜柱上的時(shí)間比建議的時(shí)間長(zhǎng)，將導(dǎo)致更多的降解，從而導(dǎo)致較低的收率Q3:亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化是否只發(fā)生在CpG環(huán)境中?無(wú)論背景*，亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化都能起作用，因此試劑盒與來(lái)自植物和其他非cpg甲基化水平高的物種的基因組DNA兼容。
Q5:可以恢復(fù)的最小DNA大小是*?50bp。
Q6:*量化/可視化轉(zhuǎn)化的DNA?
基因組DNA經(jīng)亞硫酸氫鹽處理后，非甲基化胞嘧啶殘基轉(zhuǎn)化為尿嘧啶?；厥盏?/span>DNA通常富含A、U和t。原來(lái)的堿基配對(duì)不復(fù)存在。相反，它是單鏈的，在室溫下有有限的非特異性堿基配對(duì)。260nm處的吸收系數(shù)與RNA相似。當(dāng)測(cè)定亞硫酸氫鹽處理后的DNA濃度時(shí)，Ab260 = 1.0的值為40 μg/ml。為了觀察，在瓊脂糖凝膠上運(yùn)行轉(zhuǎn)化后的DNA，然后將凝膠在冰上冷凍30分鐘。預(yù)計(jì)涂片將在100-1500bp之間。Q7:是*導(dǎo)致了低轉(zhuǎn)化率/低產(chǎn)量?
低轉(zhuǎn)換效率和低產(chǎn)量可能是由于各種不同的實(shí)驗(yàn)特定條件。請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持，討論您的具體實(shí)驗(yàn)條件和進(jìn)一步的故障排除與產(chǎn)品*。
Q8:亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA在20°c下能穩(wěn)定多久?
轉(zhuǎn)換后的DNA應(yīng)在m -洗脫緩沖液中洗脫，以保持轉(zhuǎn)換后的DNA穩(wěn)定，以便長(zhǎng)期保存。如長(zhǎng)期保存(<-20C)，樣品應(yīng)保存一個(gè)月以上。盡量減少冷凍/解凍，以保持亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA穩(wěn)定。
Cat # | Name | Size |
C1004-50 | Zymo-Spin IC Columns | 50 Pack |
C1001-50 | Collection Tubes | 50 Pack |
D5002-4 | M-Wash Buffer | 24 ml |
D5001-4 | M-Wash Buffer | 6 ml |
D5005-3 | M-Binding Buffer | 30 ml |
D5002-6 | M-Elution Buffer | 4 ml |
D5001-6 | M-Elution Buffer | 1 ml |
D5006-3 | M-Binding Buffer | 125 ml |
D5030-5 | L-Desulphonation Buffer | 10 ml |
D5031-5 | L-Desulphonation Buffer | 40 ml |
D5030-1 | Lightning Conversion Reagent | 1.5 ml |
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