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產品名稱：Biosharp BL623A 脂質體2000/Lip2000轉染試劑

產品貨號：BL623A

產品品牌：Biosharp

產品產地：國內

產品規(guī)格：0.5 ml

用途范圍：壁細胞和懸浮細胞（哺乳動物細胞系）的轉染

英文名稱：Lip2000Transfection   Reagent

保存條件：2-4℃保存一年（避免冷凍）。

產品簡介：

Lip2000是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑,適合于將核酸(DNA和RNA)轉染至真核細胞,具有低細胞毒性、對多種類型的細胞都具有高轉染效率、轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。

質粒DNA的轉染：

對大多數細胞來說,DNA(μg)與Lip2000(μl)的比例為1:2~1:3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。

使用說明：（以 24 孔板為例）

1、細胞鋪板：

貼壁細胞：轉染前一天,用500μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5-2×105 細胞,使之 天能達到 70-90%匯合。 

懸浮細胞：在準備 DNA-Lip2000 復合物之前,用500μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4-8×105細胞即可。

2、對每個轉染樣品,進行以下操作

（1）在離心管里分別加入50μl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基）和 0.8μg DNA,輕柔混勻,制成DNA稀釋液。

（2）在另一個離心管里分別加入50μl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基）和2.0μl Lip2000（注意用前先混勻）,輕柔混勻,制成 Lip2000稀釋液,室溫靜置 5 分鐘。

（3）將 DNA 稀釋液和 Lip2000 稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置 20分鐘,形成DNA-Lip2000 復合物。DNA-Lip2000 復合物在室溫下可穩(wěn)定存在 6 小時。

3、將 DNA-Lip2000 復合物加入到接種好的細胞中,將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動,使復合物分散均勻。

4、在 37℃CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 4-6 小時后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18-48 小時

5、如果要篩選穩(wěn)定細胞株,則在轉染24小時后將細胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中, 天加入選擇性培養(yǎng)基進行篩選。

質粒 DNA 轉染的優(yōu)化：

為達到 的轉染效率和降低細胞毒性的影響,可以對 DNA 和 Lip2000 的比例以及細胞密度進行優(yōu)化,一般在1:0.5~1:5 的范圍內優(yōu)化DNA (μg) 和 Lip2000 (μl) 的比例。

產品名稱：Biosharp BL623A 脂質體2000/Lip2000轉染試劑

產品貨號：BL623A

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