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| 產地 | 國內 |
| 品牌 | Biosharp |
| 貨號 | BL623A |
| 用途 | 壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞系)的轉染 |
| 包裝規(guī)格 | 0.5 ml |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 別名 | 轉染試劑 |
| 是否進口 | 否 |
產品名稱:Biosharp BL623A 脂質體2000/Lip2000轉染試劑
產品貨號:BL623A
產品品牌:Biosharp
產品產地:國內
產品規(guī)格:0.5 ml
用途范圍:壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞系)的轉染
英文名稱:Lip2000Transfection Reagent
保存條件:2-4℃保存一年(避免冷凍)。
產品簡介:
Lip2000是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑,適合于將核酸(DNA和RNA)轉染至真核細胞,具有低細胞毒性、對多種類型的細胞都具有高轉染效率、轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。
質粒DNA的轉染:
對大多數細胞來說,DNA(μg)與Lip2000(μl)的比例為1:2~1:3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。
使用說明:(以 24 孔板為例)
1、細胞鋪板:
貼壁細胞:轉染前一天,用500μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5-2×105 細胞,使之 天能達到 70-90%匯合。
懸浮細胞:在準備 DNA-Lip2000 復合物之前,用500μl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4-8×105細胞即可。
2、對每個轉染樣品,進行以下操作
(1)在離心管里分別加入50μl無血清培養(yǎng)基(如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基)和 0.8μg DNA,輕柔混勻,制成DNA稀釋液。
(2)在另一個離心管里分別加入50μl無血清培養(yǎng)基(如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基)和2.0μl Lip2000(注意用前先混勻),輕柔混勻,制成 Lip2000稀釋液,室溫靜置 5 分鐘。
(3)將 DNA 稀釋液和 Lip2000 稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置 20分鐘,形成DNA-Lip2000 復合物。DNA-Lip2000 復合物在室溫下可穩(wěn)定存在 6 小時。
3、將 DNA-Lip2000 復合物加入到接種好的細胞中,將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動,使復合物分散均勻。
4、在 37℃CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 4-6 小時后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18-48 小時
5、如果要篩選穩(wěn)定細胞株,則在轉染24小時后將細胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中, 天加入選擇性培養(yǎng)基進行篩選。
質粒 DNA 轉染的優(yōu)化:
為達到 的轉染效率和降低細胞毒性的影響,可以對 DNA 和 Lip2000 的比例以及細胞密度進行優(yōu)化,一般在1:0.5~1:5 的范圍內優(yōu)化DNA (μg) 和 Lip2000 (μl) 的比例。
產品名稱:Biosharp BL623A 脂質體2000/Lip2000轉染試劑
產品貨號:BL623A
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