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| 產(chǎn)地 | |
| 品牌 | 康為世紀(jì) |
| 貨號 | CW2105S |
| 用途 | 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒(5-15mL) |
| 包裝規(guī)格 | 50 preps |
| 純度 | /% |
| CAS編號 | |
| 別名 | 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒(5-15mL) |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒
產(chǎn)品貨號：CW2105S
額外試劑要求：
無水乙醇，異丙醇。
產(chǎn)品組分：
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
1．所有組分可在干燥、室溫（15-30℃）環(huán)境穩(wěn)定保存1年，更長時間保存可置于2-8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩(wěn)定保存6個月。
2． 次使用前，將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混勻，置于2–8℃保存，使用前需在室溫中放置一段時間，恢復(fù)至室溫后使用。
3． 次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4．使用前請先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀，如有結(jié)晶或沉淀現(xiàn)象，可在37℃水浴幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
5．注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
6．提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、菌株種類、質(zhì)粒大小、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。
使用說明：
1．取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液，加入離心管（自備）中，13,000 rpm（~16,200×g）離心1分鐘收集細(xì)菌，盡量吸棄全部上清。
2．向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1（請先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細(xì)菌沉淀。
3．向離心管中加入500 μl Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解，室溫放置3-5分鐘。此時溶液應(yīng)變得清亮粘稠。
4．向離心管中加入500 μl Buffer E3，立即上下顛倒混勻8-10次，此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘。13,000 rpm離心5分鐘，吸取上清，將上清加入過濾柱（Endo-RemoverFM）中（已裝入收集管），13,000 rpm離心1分鐘過濾，將收集管中的濾液轉(zhuǎn)移到離心管（自備）中。
5．向?yàn)V液中加入450 μl異丙醇，上下顛倒混勻。
6．柱平衡：向已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns DL）中加入200 μl Buffer PS，13,000 rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7．將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱（已裝入收集管）中。
8．13,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
9．向吸附柱中加入750 μl Buffer PW（請先檢查是否已加入無水乙醇），13,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液。
10.將吸附柱重新放回收集管中，13,000 rpm離心1分鐘。
11.將吸附柱置于一個新的離心管（自備）中，向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB，室溫放置2-5分鐘，13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質(zhì)粒。
保存條件：室溫（15-30℃）
產(chǎn)品訂購信息：
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
康為世紀(jì) CW2105S EndoFree Plasmid Midi Kit 50 preps
